تکثیر ،کلونینگ و بیان ژن نوترکیب bp۲۶( omp۲۸ )باکتری b‏. melitensisجدا شده از استان مرکزی و تخلیص پروتئین bp۲۶

Authors

مریم عزیزپور مغوان1،سید داود حسینی2، حسین بصیری3، ندا اکبری 3

میترا نظام آبادی4 ، صابر اسکندری5، محسن ساریخانی6

abstract

مقدمه و هدف: بروسلوز بیماری ناتوان کننده ای است که و هزینه گزافی را بر اقتصاد و اجتماع تحمیل می کند . بنابراین استفاده از بهترین ، دقیق ترین و به صرفه ترین روش برای تشخیص این بیماری ضروری می باشد . عامل شایع بروسلوز در ایران b. melitensis بوده و پروتئین bp26 این باکتری خاصیت آنتی ژنیسیته خوبی دارد. بنابراین هدف از این تحقیق تولید پروتئین bp26 نوترکیب از باکتریb. melitensis توسط وکتور بیانیpet-28a می باشد .  موادوروش کار: در این مطالعه از باکتری کشت شده تخلیص dna ژنومیک به روش پروتئیناز k و فنل/کلرفرم ، انجام شد .سپس با توجه به اطلاعات توالی ژن bp26 b. melitensis موجود در بانک اطلاعات ژن ، برای ژن مذکور پرایمر طراحی شده و واکنش pcr راه اندازی، بهینه سازی و انجام شد. در ادامه محصول pcrابتدا در وکتور ptz57r/t الحاق گردید و پس از آن در وکتور pet-28aکلون گردید . وکتور نوترکیب به میزبان e. coli bl21(de3) منتقل گردید و پروتئین نوترکیب و با ستون کروماتوگرافی ni-nta علیه his tag تخلیص گردید . نتایج وبحث: اندازه ژن به دست آمده از واکنش زنجیره ای پلیمراز با اندازه بخشی از ژنbp26 b. melitensis موجود در بانک اطلاعات ژن مطابقت داشت . ژن bp26 بدون القاء با iptg به میزان کم بیان شده و با افزودن آن به غلظت mm 1 به محیط کشت در ساعت سوم ، حداکثر بیان را مشاهده نمودیم . تولید پروتئین نوترکیب bp26 از باکتری b. melitensis بومی استان مرکزی با استفاده ازناقل پلاسمیدی pet-28a امکان پذیر گردید . با توجه به اهمیت این پروتئین و به منظور بررسی های بیشتر در آینده ، امکان تولید آن در کشور فراهم شد .

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

تکثیر ،کلونینگ و بیان ژن نوترکیب bp26( omp28 )باکتری B‏. Melitensisجدا شده از استان مرکزی و تخلیص پروتئین BP26

 مقدمه و هدف: بروسلوز بیماری ناتوان کننده ای است که و هزینه گزافی را بر اقتصاد و اجتماع تحمیل می کند . بنابراین استفاده از بهترین ، دقیق ترین و به صرفه ترین روش برای تشخیص این بیماری ضروری می باشد . عامل شایع بروسلوز در ایران B. melitensis بوده و پروتئین BP26 این باکتری خاصیت آنتی ژنیسیته خوبی دارد. بنابراین هدف از این تحقیق تولید پروتئین BP26 نوترکیب از باکتریB. Melitensis توسط وکتور بی...

full text

تکثیر، کلونینگ و بیان ژن bp۲۶((omp۲۸ brucellamelitensis بومی استان مرکزی به منظور تولید پروتئین نو ترکیب bp۲۶

زمینه و هدف: بروسلوز بیماری ناتوان کننده‎ای است که هزینه گزافی را بر اقتصاد و اجتماع تحمیل می‎کند. بنابراین استفاده از بهترین، دقیق‎‎‎‎‎‎ترین و به صرفه‎ترین روش برای تشخیص این بیماری ضروری می‎باشد. عامل شایع بروسلوز در ایران بروسلا بوده و پروتئین bp26این باکتری خاصیت آنتی ژنیسیته خوبی دارد. بنابراین هدف از این تحقیق تولید پروتئین bp26 نوترکیب از باکتری بروسلا جهت استفاده در کیت تشخیص بروسلوز می...

full text

کلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین SNAP-25

Background & Objectives:Clostridial neurotoxin inhibits neurotransmitter release by selective and specific intracellular proteolysis of synaptosomal associated protein of 25KDa (SNAP-25), synaptobrevin/VAMP-2 and syntaxin. SNAP-25 is one of the components that forms docking complex in synaptic ends. This protein is subtrate for botulinum neurotoxins types A,C, and E. Each of these toxin serotyp...

full text

کلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب زیرواحد بتای هورمون TSH انسانی (TSHβ) و ارزیابی آنتیژنیسیته آن

Background and purpose: Measurement of thyroid stimulating hormone (TSH), usually through RIA and ELISA tests, is very useful for the diagnosis of thyroid disorders. Considering the structural similarity between alpha chain of TSH and the three glycoprotein hormones of luteinizing hormone, follicle stimulating hormone, and chorionic gonadotropin (CG), in this study, we aimed to examine the prod...

full text

بهینه سازی بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب لیپوپروتئین مرتبط با پپتیدوگلیکان (PAL) باکتری لژیونلا پنوموفیلا

  زمینه و هدف: اکثر تست های موجود برای تشخیص پنومونی لژیونلایی، با مشکلات زیادی از جمله حساسیت و ویژگی پائین و عدم توانایی در فراهم نمودن نتیجه در یک زمان کلینیکی مناسب مواجه هستند. از آنجایی که لیپوپروتئین مرتبط با پپتیدوگلیکان ( PAL ) لژیونلا پنوموفیلا در درون ادرار ترشح شده و به عنوان یک آنتی ژن در تمام سویه های آن وجود دارد. لذا برای تشخیص بیماری لژیونر از طریق ادرار مورد توجه قرار گرفته اس...

full text

بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب ژن سنتتیک زنجیره HC تتانوتوکسین در سیستم بیانی پروکاریوت

زمینه و هدف: توکسین کلستریدیوم تتانی یا تتانواسپاسمین عامل بیماری مهلک کزاز است. امروزه از توکسوئید آن به عنوان واکسن استفاده می شود. تتانواسپاسمین شامل سه زنجیره L، HN و HC می باشد. زنجیره HC بخش اتصال دهنده و ایمونوژنیک آن است و به عنوان کاندیدای واکسن مطرح می باشد. هدف از این مطالعه، طراحی و تهیه ژن صناعی زنجیره HC تتانواسپاسمین، بیان و بهینه سازی آن و تخلیص پروتئین نوترکیب حاصل از آن به عنو...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
فصلنامه دامپزشکی و آزمایشگاه

جلد ۴، شماره ۱، صفحات ۷۰-۷۰

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023